毛細(xì)管電泳（CE）基因分析儀平臺(tái)，你知道有哪些嗎？
1987年，賽默飛Applied Biosystems在Sanger測(cè)序原理的基礎(chǔ)上發(fā)布第一代真正商業(yè)化的自動(dòng)測(cè)序儀。
1996年，推出310型全自動(dòng)遺傳分析儀，實(shí)現(xiàn)全部操作自動(dòng)化，包括自動(dòng)灌膠、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)數(shù)據(jù)收集分析等。也標(biāo)志著從平板膠進(jìn)入毛細(xì)管電泳時(shí)代。
隨后，伴隨著儀器的更新，通量逐漸提高，出現(xiàn)我們常見的3130系列、3730系列以及經(jīng)典的3500系列。其中3500Dx和3500xl Dx基因分析儀已獲得NMPA認(rèn)證。
站在巨人的肩膀上，2017年，推出最簡(jiǎn)便、自動(dòng)化程度最高的一款基因分析儀，它就是SeqStudio。
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經(jīng)過(guò)數(shù)十年結(jié)果的驗(yàn)證，Sanger測(cè)序是DNA測(cè)序的金標(biāo)準(zhǔn)，此外，多重片段分析也是您廣泛應(yīng)用的遺傳分析技術(shù)。
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03
Sanger測(cè)序的工作流程從樣本制備到最終數(shù)據(jù)分析，包括PCR擴(kuò)增、PCR產(chǎn)物純化、循環(huán)測(cè)序、測(cè)序反應(yīng)純化、毛細(xì)管電泳和數(shù)據(jù)分析。如圖，賽默飛提供Sanger測(cè)序全套解決方案。
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測(cè)序試劑盒可以根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇，可參考如下的表格：
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* Recommended: ++
* Satisfactory: +
* Not recommended: -
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Sanger測(cè)序流程中，循環(huán)測(cè)序反應(yīng)時(shí)PCR產(chǎn)物的用量究竟要加多少？
不同長(zhǎng)度的PCR片段對(duì)產(chǎn)物的需求量不一樣，一般可參考如下列表：
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POP4聚合物可實(shí)現(xiàn)快速反應(yīng)，更適合于人類身份鑒定和片段分析。POP6聚合物是進(jìn)行長(zhǎng)片段測(cè)序的理想選擇。當(dāng)和BigDye V1.1一起使用時(shí)，POP-6也可以用于測(cè)定非常靠近5’端的堿基。POP-7聚合物介于POP-4和POP-6之間，他非常的靈活，適用于很多的應(yīng)用。
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一種是在引物5’端標(biāo)記熒光基團(tuán)，另一種是用熒光標(biāo)記ddNTP。
5’端引物標(biāo)記通常用于微衛(wèi)星序列分析；熒光標(biāo)記ddNTP通常用于SNaPshot多重分析。
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片段分析實(shí)驗(yàn)常用的熒光染料組合有哪些？分別包含哪些熒光染料？
片段分析實(shí)驗(yàn)常用的熒光染料組合為G5和E5。
G5染料組合包括6-FAM、VIC、NED、PET和LIZ，通常用于微衛(wèi)星序列分析。
E5染料組合包括dR110、dR6G、dTAMRA、dROX和LIZ，主要用于SNaPshot 重分析。
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· 測(cè)序數(shù)據(jù).ab1文件建議用Sequence Analysis軟件進(jìn)行分析；
· 片段分析數(shù)據(jù).fsa文件建議用GeneMapper軟件進(jìn)行分析；
· 人類鑒定數(shù)據(jù).hid文件建議用GeneMapper ID-X軟件進(jìn)行分析